限时规范训练(三十六)一、选择题(本题共10小题，共60分)1.耐冷菌是生活在低温环境下的一类微生物，在0～5℃可生长繁殖，最高生长温度一般在30℃左右。关于耐冷菌的下列选项中错误的是()A.耐冷菌参与代谢的酶在低温下仍具有较高的催化活性B.不同取样地点相比较，北方寒冷地区水土中较易分离出耐冷菌C.探究耐冷菌生活的最适温度，自变量应为温度，无关变量应相同且适宜D.分离纯化耐冷菌的过程中，使用过的培养基及培养物必须经过消毒处理后才能丢弃答案D解析使用过的培养基必须经过灭菌处理后再丢弃，经消毒可能还会存在细菌的芽孢。2.用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时()①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A.①②B.③④C.①③D.②④答案C解析平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。3.(2022·青岛高三模拟)配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖()A.酵母菌B.自生固氮菌C.各种细菌D.纤维素分解菌答案D解析该培养基中纤维素粉为唯一碳源，而只有纤维素分解菌能利用纤维素。4.(原创题)以农作物秸秆等含纤维质丰富的材料为原料，经加工可制成燃料乙醇，这种“绿色能源”的开发备受关注。农作物秸秆经预处理后，应该选用某种酶进行水解处理，使之转化为发酵所需的葡萄糖。你认为这种酶可从以下哪种微生物中提取()A.制作腐乳的毛霉B.酿制果醋的醋酸菌C.生长在腐木上的霉菌D.土壤中分解尿素的微生物答案C解析农作物秸秆的主要成分是纤维素，应选用纤维素酶将其水解。生长在腐木上的霉菌可以合成纤维素酶。5.三个培养皿中分别加入10mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。培养36h后，计算菌落数，结果如下表。下列选项正确的是()培养皿培养基成分菌落数5\nⅠ琼脂、葡萄糖35Ⅱ琼脂、葡萄糖、生长因子250Ⅲ琼脂、生长因子0A.该实验采用的是液体培养基B.该实验采用平板划线法接种C.Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D.Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖答案D解析该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，对微生物进行计数，宜采用稀释涂布平板法(而不是平板划线法)接种；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要生长因子；Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖。6.(2022·北京西城4月)下列关于微生物培养和利用叙述不正确的是()A.利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B.接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少答案A解析接种划线可以将菌体分散，最后得到单个菌体细胞，经过培养可以得到单个菌落；用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数；在泡菜的腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，10天后含量开始下降；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌。7.(2022·福州模拟)下列对灭菌和消毒的理解不正确的是()A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B.消毒和灭菌实质上是完全相同的C.接种环用灼烧法灭菌D.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法答案B解析消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。8.下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是()A.细菌能在液体培养基中以二分裂方式迅速扩增B.噬菌体或大肠杆菌可在蛋白胨培养基中增殖C.灭菌的目的是消灭与培养菌竞争的杂菌D.稀释涂布法分散细菌得到单菌落的效果更好答案B解析细菌繁殖方式是二分裂方式，噬菌体是没有细胞结构的病毒，需要生活在活细胞中才能增殖，在蛋白胨培养基中不能增殖；想要得到单个菌落可以用划线法，如果稀释后再划线效果更好；灭菌目的是防止杂菌和培养菌发生竞争。9.下列是关于“微生物接种以及单个菌落观察”实验操作的叙述，其中错误的是()5\nA.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基，经高温、高压灭菌后倒入培养皿备用B.接种前接种环须经酒精灯火焰灼烧C.接种时应用无菌刮铲在培养基表面涂匀D.倒置培养皿，37℃恒温培养48～72小时后观察答案C解析培养微生物要防止杂菌污染，所以要对培养基及和培养有关仪器灭菌；因为是观察单个菌落，应该用划线法；防止培养皿盖上杂菌随水珠落下，要倒置培养基。10.(2022·赤峰质检)下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4伊红美蓝青霉素琼脂蒸馏水含量10g10g2g0.4g0.065g1万单位适量1000mLA.能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因B.此培养基是天然鉴别培养基C.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准D.此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中答案D解析此表表示鉴定大肠杆菌的合成培养基。抗性基因一般位于大肠杆菌的质粒上，而不是拟核上；此培养基含有青霉素，会抑制细菌生长。二、非选择题(本题共3小题，共40分)11.(15分)(2022·全国重点中学模拟)有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、以及微量元素配制的培养基，成功地筛选出能产生纤维素酶的微生物。请分析后回答下列问题：(1)培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________，这种培养基属于________培养基。(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，应向培养基中加入________。(3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。若获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法，还可用________方法进行接种。(4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是____________________________________________________________________________________________________________。答案(1)纤维素碳源选择(2)刚果红(3)接种环灼烧稀释涂布平板(4)防止造成环境污染解析(1)利用只含纤维素作为唯一碳源的培养基分离纯化分解纤维素的微生物，这类培养基属于选择培养基。(2)在培养基中加入刚果红，它可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，在培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。(3)用平板划线法进行接种的工具是接种环，接种环常用灼烧方法进行灭菌。(4)使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样可以避免杂菌对环境造成污染。12.(10分)生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：5\n土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养请回答下列有关问题：(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来，获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环常采用的灭菌方法分别是_________________________________________________。(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有________，常使用________的方法从发酵液中提取纯酒精。(3)从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基应以________作为唯一碳源。(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行________处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和________法。答案(1)纯培养高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌(2)温度、pH、氧气浓度等蒸馏(3)富含纤维素的纤维素(4)固定化包埋解析(1)在微生物培养过程中，培养基常用高压蒸汽灭菌，接种环常用灼烧灭菌。(2)温度、pH影响酶的活性，氧气浓度影响发酵产物。因酒精沸点较低，故可用蒸馏法对酒精进行提纯。(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中，分离所用的培养基应以纤维素作为唯一碳源，以抑制以其他微生物的生长。(4)对酶进行固定化处理可以使酶重复使用，提高利用率。13.(15分)(原创题)在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解，长期使用可导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)。(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。(2)要在长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从物理性质、用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是__________。不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是_______________________________________。(3)在划线培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是_________________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。(4)在固体培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是________，有透明圈菌落利用的氮源主要是，据此可筛选出目的菌。(5)科研人员用射线处理该细菌获得两个突变株A和B，然后对A和B进行实验，结果如下表：接种的菌种一般培养基实验处理及结果5\nA不生长添加营养物质甲，能生长B不生长添加营养物体乙，能生长A+B能生长不添加营养物质甲、乙，能生长突变株A不能在一般培养基上生长的原因是_________________。突变株A和B混合在一起接种于一般培养基中能生长的最可能原因是。答案(1)稀释(2)在无氮固体培养基中添加了该除草剂调pH(3)培养基中缺少这些细菌可利用的氮源(4)氮气该除草剂(5)突变株A缺乏合成营养物质甲所需要的酶A生长需要的营养物质甲，B可以提供；B生长需要的营养物质乙，A可以提供解析(1)制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。(2)从物理性质上来看，图中培养皿中培养基属于固体培养基，从用途方面来看，该培养皿中培养基属于选择培养基，该除草剂为含氮有机化合物，降解该除草剂的细菌可以除草剂为氮源。故该培养基中除加入除草剂为氮源外，不再含有其他氮源，以选择出能降解该除草剂的细菌。培养基配制的一般程序是：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。(3)在以除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解除草剂的细菌(除具有固氮能力的细菌外)是不能生长的。(4)由于含一定量该除草剂的培养基不透明，形成透明圈是由于该除草剂被某些细菌降解。(5)突变株A的生长依赖于营养物质甲，突变株B的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能是A为B提供了营养物质乙，B为A提供了营养物质甲。5
