第2讲 微生物的培养与应用 1.关于灭菌和消毒的叙述，不正确的是( )A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法 2.下列所述环境条件下的微生物，能正常生长繁殖的是( )A．在缺乏碳源的培养基中的硝化细菌B．在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌C．在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌D．在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流感病毒 3.下列关于灭菌的说法中，不正确的是( )A．灭菌是杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B．对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C．培养基一般采用高压蒸汽灭菌法D．高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性 4.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应稀释倍数为106的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生的原因可能有( )①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④ 5.获得纯净培养物的关键是( )A．将用于微生物培养的器皿、接种工具、培养基等进行灭菌B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养D．防止外来杂菌的入侵4\n 6.氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表。培养基的组成液体培养基Ⅰ号Ⅱ号Ⅲ号蛋白胨10g－－牛肉膏5g－－氯苯5mg50mg20～80mg氯化钠5g5g5g硝酸铵－3g3g无机盐(无碳)－适量适量蒸馏水1L1L1L(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的 琼脂 。(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是 先调pH，后灭菌 。(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于 通用(基本) 培养基和 选择 培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是 硝酸铵 。(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为 芽孢 。(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线(如图2)。从图2可知，SP1菌在 20mg/L氯苯 培养条件下最早停止生长，其原因是 碳源最早耗尽 。 1.下列关于培养基的叙述，错误的是( )A．氮源、无机盐、水等是微生物生长不可缺少的营养要素4\nB．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基C．可在培养基中加入磷酸氢二钾和磷酸二氢钾，用于维持pH的相对稳定D．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 2.下列不属于微生物常用的分离、纯化方法是( )A．单细胞挑取法B．平板划线法或稀释涂布平板法C．接斜面法D．选择培养基分离法 3.用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是( )A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230B．涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和256，取平均值163D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 4.下列关于无菌技术的说法中，错误的是( )A．无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开B．在实验室中不可以吃东西、喝水，防止被微生物污染C．使用后的培养基在丢弃前不用灭菌处理D．无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染 5.分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是( )A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B．富集培养这一步可省略，但培养的纤维素分解菌少C．经稀释培养后，用刚果红染色D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上 6.某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混合在一起。请你完成分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌的实验步骤，并回答有关问题：(1)主要步骤：①制备两种培养基：一种是__________培养基，另一种是____________的培养基。分别分成两份，依次标上A、A′和B、B′，备用。②分别向A、B培养基中接种____________。③接种后，放在恒温箱中培养3～4天。④分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种，接种到A′、B′培养基中。⑤接种后，把A′、B′培养基放入恒温箱中培养3～4天。(2)回答问题：4\n在步骤①②中，为保证无杂菌污染，实验中应采用的主要措施有培养基高压蒸汽灭菌 、 接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌 、 接种过程在酒精灯火焰附近进行 。④⑤两个步骤的目的是获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌 。第2讲夯实双基1．B 2.A 3.A 4.A 5.D6．(1)琼脂 (2)先调pH，后灭菌 (3)通用(基本) 选择 硝酸铵 (4)芽孢 (5)20mg/L氯苯 碳源最早耗尽拓展提升1．D 2.C 3.D 4.C 5.A6．(1)①无氮 加青霉素 ②混合菌 (2)培养基高压蒸汽灭菌 接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌 接种过程在酒精灯火焰附近进行 获得纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌4
