【名师一号模块新课标】2016届高考生物总复习专题2微生物的培养与应用双基考题新人教版选修1建体系 练能力 速效提升1．(2014·天津理综)MRSA菌是一种引起皮肤感染的“超级细菌”，对青霉素等多种抗生素有抗性。为研究人母乳中新发现的蛋白质H与青霉素组合使用对MRSA菌生长的影响，某兴趣小组的实验设计及结果如表。下列说法正确的是( )组别培养基中的添加物MRSA菌1100μg/mL蛋白质H生长正常220μg/mL青霉素生长正常32μg/mL青霉素＋100μg/mL蛋白质H死亡A.细菌死亡与否是通过光学显微镜观察其细胞核的有无来确定的B．第2组和第3组对比表明，使用低浓度的青霉素即可杀死MRSA菌C．实验还需设计用2μg/mL青霉素做处理的对照组D．蛋白质H有很强的杀菌作用，是一种新型抗生素解析 本题考查实验方案设计及真、原核生物区别等知识。细菌属于原核生物，没有核膜包被的细胞核，故A项错误。第2组和第3组对比，实验变量不唯一，不能说明低浓度青霉素有杀死MRSA菌的作用，应是青霉素与蛋白质H共同起作用。若要证明这一点，需设计用2μg/mL青霉素单独作用的对照组。故B项错误，C项正确。该实验设计和结果不能证明蛋白质H有很强的杀菌作用，故D项错误。答案 C2．(2015·深圳调研)某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌的数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是( )A．利用平板划线法对细菌进行计数4\nB．用以石油为唯一碳源的培养基筛选C．采用稀释涂布平板法分离菌种D．称取和稀释土壤样品时应在火焰旁解析 分离细菌常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，但平板划线法不能用于细菌的计数；筛选能分解石油的细菌，要以石油作为培养基中唯一的碳源；筛选细菌的整个操作过程都需要在无菌条件下进行，所以应在火焰旁进行。答案 A3．普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。(1)图甲中，过程①需要的酶有________________________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是_____________。(2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是________；推测该同学接种时可能的操作失误是________。(3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是________________________________________________________。(4)用凝胶色谱法分离α淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。解析 (1)图甲中①为基因表达载体的构建，应用限制性核酸内切酶及DNA连接酶。筛选能利用淀粉的酵母菌，应使用以淀粉为唯一碳源的培养基。图中②③过程需重复几次，目的是进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌。(2)据图乙分析，该同学的接种方法应是稀释涂布平板法；图乙培养基中菌落分布不均匀，可能是该同学涂布不均匀所致。4\n(3)以淀粉为原料，在密闭条件下发酵时，因工程酵母菌利用淀粉能力强，进行酒精发酵产生的CO2较多，应先于普通酵母菌进行排气。(4)利用凝胶色谱法分离α淀粉酶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。因此，在色谱柱中移动速度越慢的蛋白质，相对分子质量越小。答案 (1)限制性核酸内切酶、DNA连接酶 淀粉 进一步筛选纯化获得分解淀粉能力强的酵母菌(2)稀释涂布平板法 涂布不均匀(3)工程酵母 工程酵母菌分解淀粉产生葡萄糖的能力强，导致酒精发酵产生CO2的速率更快(4)小4．(2014·课标全国理综Ⅱ)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为________。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是__________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高________的利用率。解析 为了检测培养基灭菌平板是否合格，应对空白平板先行培养一段时间。每升水样中的活菌数为(39＋38＋37)÷3÷0.1×100×1000＝3.8×1074\n(个)。对接种环应进行灼烧灭菌。为了将聚集的菌体逐步稀释以获得单个菌落，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。A表示的是平板划线法接种培养后得到的结果，B表示的是用稀释涂布平板法接种后得到的结果。答案 (1)检测培养基平板灭菌是否合格3．8×107(2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落(3)B(4)溶解氧 营养物质4
