必考点31 微生物的利用与传统发酵技术的应用依纲排查1.微生物的利用(1)常用的微生物的分离与测定方法有哪些？(2)培养基的种类及配制的一般流程是什么？(3)微生物筛选的基本原理是什么？计数的常用方法有哪些？2．传统发酵技术及运用发酵加工食品的基本方法果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的基本原理及一般操作流程分别是什么？1．理清微生物培养的“5”种基本技术(1)培养基的制备：计算→________→溶化→________→倒平板。(2)无菌技术：主要包括________和________。(3)倒平板操作：待培养基冷却至________左右时，在____________________附近倒平板。(4)平板划线操作：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面________________的操作，将聚集的菌种________________分散到培养基的表面。注意划线的方法(如图)。(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列的梯度稀释然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成__________________。2．把握“2”种微生物的分离与计数方法(1)选择培养基类型15\n①筛选尿素分解菌：用以________为唯一氮源的培养基。②筛选纤维素分解菌：用富含____________、添加刚果红的培养基培养。(2)微生物计数的“2”大方法①________________________；②显微计数法。(3)微生物的“2”大鉴定方法鉴定分解尿素的细菌含酚红指示剂的以尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红，则该菌能分解尿素鉴定纤维素分解菌3.理清“4”种传统发酵食品的技术食品菌种呼吸类型原理温度果酒酵母菌无氧无氧呼吸产生酒精18～25℃果醋醋酸菌____糖(酒精)→醋酸30～35℃腐乳毛霉等____蛋白酶、脂肪酶水解蛋白质、脂肪15～18℃泡菜乳酸菌____无氧呼吸产生乳酸－题组一 聚焦微生物的利用1．微生物利用的相关判断(1)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2022·江苏，18C)( )(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2022·新课标，39(2)改编)( )(3)在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌(2022·重庆，2A)( )(4)检测土壤中细菌总数实验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数(2022·安徽，6D)( )15\n(5)培养微生物的培养基分装到培养皿后进行灭菌(2022·江苏，18A改编)( )2．(2022·江苏，19)做“微生物的分离与培养”实验时，下列叙述正确的是( )A．高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖B．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上C．为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D．用记号笔标记培养皿中菌落时，应标记在皿底上3．(2022·新课标Ⅱ，39)为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是____________________________________________。(3)示意图A和B中，________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中__________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高____________的利用率。4．(2022·潍坊一模)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。请据图回答(已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明)：15\n(1)由图推断，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为______________，目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)在将C瓶菌种接种到固体培养基之前通常要进行__________，将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和______________________法，从图中看本实验采用的是____________(填“前者”或“后者”)。(3)一段时间后，培养基出现无透明圈和有透明圈两种菌落，我们筛选的目的菌是____________菌落中的细菌，该菌落生长所需的氮元素主要来源于____________。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应如何设置对照组？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。 细菌培养和计数方法的易失分点(1)稀释涂布平板法：分离细菌，也能计数(结果偏小)。(2)平板划线法：只能纯化细菌，不能计数。(3)显微计数法：不能区分细菌死活(结果偏大)。题组二 聚焦传统发酵技术的应用5．传统发酵技术的相关判断(1)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(2022·广东，4A)( )(2)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(2022·广东，4B)( )(3)腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶(2022·广东，4D)( )(4)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵(2022·江苏，14B改编)( )(5)在制作果醋时，如果条件适宜，醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸(2022·江苏，21B改编)( )15\n(6)在制作腐乳时，将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量(2022·江苏，21D改编)( )(7)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时，让发酵装置接受光照并放在45℃处(2022·北京，1AD改编)( )6．(2022·江苏，17)关于“腐乳的制作”实验，下列叙述错误的是( )A．将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高，影响毛霉生长B．腐乳坯若被细菌污染，则腐乳坯表面会出现黏性物C．勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长D．装坛阶段加入料酒，可有效防止杂菌污染7．图1是果酒和果醋制作的实验流程，图2是某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：(1)完成图1中的实验流程。(2)冲洗的主要目的是____________，冲洗应特别注意不能______________，以防止菌种的流失。(3)图2装置中的充气口在____________时关闭，在__________时连接充气泵，并连续不断地向内____________。(4)排气口在果酒发酵时排出的气体是____________产生的____________，在果醋发酵时排出的是________________________________________________________________________。(5)写出与(4)题有关的反应方程式：__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(6)若果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？并说明原因。15\n________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(7)在酒精发酵时瓶内温度一般应控制在____________。醋酸发酵时温度一般应控制在________________。(8)果酒制作完成后，可以用____________来检测酒精的生成，在酸性条件下，酒精与之反应呈现________色。8．(2022·广东，29)泡菜是我国的传统食品之一，但制作过程中产生的亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，某兴趣小组准备参加“科技创新大赛”，查阅资料得到下图。(1)制作泡菜时，泡菜坛一般用水密封，目的是____________________________。乳酸菌发酵第一阶段的产物有________________________。(2)据上图，与第3天相比，第8天后的泡菜更适于食用，因为后者____________________________；pH呈下降趋势，原因是_______________________。(3)该小组得到一株“优选”乳酸菌(亚硝酸盐还原酶活力比普通乳酸菌高5倍)，拟参照资料的实验方案和食盐浓度(4%～10%)，探究与普通乳酸菌相比用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定其最适条件。请你设计一个实验结果记录表，并推测实验结论。 果酒、果醋、腐乳及泡菜制作过程中的注意事项15\n(1)果酒和果醋的制作要注意温度、气体和发酵时间的控制。(2)腐乳制作中盐、酒和各种香辛料的作用有共同之处：既具有调味作用，也具有杀菌防腐的作用。(3)在泡菜制作过程中，亚硝酸盐的含量也是变化的，一般是先增加后降低，测定亚硝酸盐含量的目的是掌握取食泡菜的最佳时间。提醒：完成作业 考点过关练3115\n二轮专题强化练姓名：________ 班级：________ 学号：________考点过关练31微生物的利用与传统发酵技术的应用1．(2022·新课标Ⅰ，39)植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将________________分解成____________。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的____________。(3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲＋＋＋＋－＋＋培养基乙＋＋＋－＋＋＋注：“＋”表示有，“－”表示无。据表判断，培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________________________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是________________________________________________________________________________________________________________________。2．(2022·四川，10)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。15\n(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______________________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是______________________________。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是__________________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_____________________________________________________________________________________________________________。(4)为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_____________________________________________________________________________________________________________________________________________，该实验设计是否合理？为什么？__________________________________________________________________________________________________________________________。3．回答下列有关发酵食品制作的相关问题：(1)制作果酒时，所用的微生物是__________，葡萄汁装入发酵瓶时，要留约1/3的空间，目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)制作果醋时，发酵方式为________________________________________________，需适时__________________。15\n(3)制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，其目的是______________________________________。制成的泡菜还要检测亚硝酸盐的含量，亚硝酸盐与某些化学物质发生反应后形成_________________________________________________色染料。(4)腐乳制成后在表面有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的__________，对人体无害。4．(2022·威海二模)生物兴趣小组的同学利用新鲜苹果榨取果汁并制作果酒，简要流程如下：→发酵→果酒(1)分离酵母菌应使用____________培养基。(2)酵母菌的酒精发酵温度一般控制在________，在该温度下最适合酵母菌繁殖，请简要说明理由：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)在酸性条件下，可用________________来检测发酵产物中是否有酒精产生。若想进一步检测所得果酒中酵母菌的密度，可采用________________法。(4)果汁为酵母菌的生长和繁殖提供的营养成分是_________________________________________________________________________________________________________。(5)发酵完成后，生物兴趣小组的同学制作的果酒品质非常好。为了方便后续年级使用，可将菌液________________________________________________________________________________________________________________________________________________保存。15\n学生用书答案精析专题十三 生物技术实践必考点31 微生物的利用与传统发酵技术的应用核心提炼1．(1)称量 灭菌 (2)消毒 灭菌 (3)50℃ 酒精灯火焰(4)连续划线 逐步稀释 (5)单个的菌落2．(1)①尿素 ②纤维素 (2)①稀释涂布平板法 3．需氧 需氧 无氧题组突破1．(1)× (2)√ (3)× (4)× (5)×2．D [A项错，高压灭菌加热结束后，让其自然冷却后再慢慢打开排气阀以排除余气，然后才能开盖取物；B项错，倒平板时左手拿培养皿，右手拿锥形瓶，左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，倒入培养基后立即盖上培养皿皿盖；C项错，接种环灼烧灭菌之后，应待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种；D项对，在微生物的培养中，一般将培养皿倒置，在皿底上用记号笔做标记。]3．(1)检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×107 (2)灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落 (3)B (4)溶解氧 营养物质解析 (1)为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前，随机取灭菌后的空白平板先行培养一段时间。0.1mL稀释液中平均有(39＋38＋37)/3＝38个活菌，则每毫升稀释液中活菌的数目为38/0.1＝380，则稀释前每毫升水样中活菌数目为380×100＝3.8×104，则每升水样中活菌数目为3.8×104×1000＝3.8×107。(2)接种环、接种针等金属用具可直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，以达到迅速彻底灭菌的目的。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，其目的是将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落。(3)比较图A和图B可以看出：A培养基中细菌的分布呈线性，是用平板划线法接种培养后得到的结果；B培养基中细菌均匀分布，是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。(4)振荡培养可以提高培养液中溶解氧的含量，还可以使菌体与培养液充分接触，提高了营养物质的利用率，因此振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。15\n4．(1)选择培养 初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并增加其数量 (2)梯度稀释 稀释涂布平板 后者 (3)有透明圈 莠去津 (4)配制的培养基灭菌后不接种菌种，与实验组放在相同条件下培养解析 (1)图中从A瓶到C瓶液体培养过程为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并增加其数量。(2)将菌种接种到固体培养基的方法有平板划线法和稀释涂布平板法两种，由图中固体培养基上的菌落分布比较均匀可知，该接种方法是稀释涂布平板法，包括梯度稀释操作和涂布平板操作。(3)根据题目信息“莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明”可知，能够降解莠去津的目的菌可分解莠去津，使菌落周围出现透明圈，因此选择菌落周围存在透明圈的细菌。由于培养基中只有莠去津一种氮源，因此分解莠去津的微生物所需的氮源主要由莠去津提供。(4)为弄清固体培养基中的非目的菌来自C瓶菌种还是培养基，应设置灭菌后不接种菌种的空白培养基，与实验组放在相同条件下培养，若培养基上无菌落出现，则非目的菌一定来自C瓶菌种，若培养基上出现菌落，则说明非目的菌可能来自培养基。5．(1)× (2)√ (3)√ (4)√ (5)× (6)√ (7)× (8)×6．C [A项对，将腐乳坯堆积起来会导致微生物大量繁殖，堆内温度升高，影响毛霉生长；B项对，正常情况下，毛霉等菌种会使豆腐表面长出一层菌丝，被细菌污染，腐乳坯表面会出现黏性物；C项错，适于做腐乳的豆腐含水量为70%左右，适于毛霉菌丝生长，再加水不利于腐乳成型；D项对，加入料酒，可抑制杂菌生长。]7．(1)醋酸发酵 (2)洗去浮尘 反复冲洗 (3)果酒发酵 醋酸发酵 泵入无菌空气(氧气) (4)酵母菌 CO2 (含氧量少的)空气和CO2 (5)C6H12O6―→2C2H5OH＋2CO2、C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O (6)不能。因为果酒发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌的生长，且醋酸菌的发酵条件是氧气充足 (7)18～25℃30～35℃ (8)重铬酸钾 灰绿15\n解析 (1)酒精发酵后可进行醋酸发酵。(2)冲洗的主要目的是洗去浮尘，不能反复冲洗，以防止菌种流失。(3)酵母菌是兼性厌氧型微生物，有氧时：C6H12O6＋6O2―→6CO2＋6H2O；缺氧时：C6H12O6―→2C2H5OH＋2CO2，因此在制作果酒时，应在缺氧的环境中进行。醋酸菌是好氧细菌，能够利用糖在有氧时生成醋酸，即C6H12O6＋2O2―→2CH3COOH＋2CO2＋2H2O；在糖源不足时，将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，反应简式为C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O。(4)在果酒制作过程中排气口排出的是CO2，而在果醋制作过程中因醋酸菌是好氧细菌，需要连续泵入空气，因此排气口排出的既有CO2，又有含氧量较低的空气。(6)醋酸菌发酵的条件是氧气充足，在果酒发酵旺盛时的缺氧环境下能抑制醋酸菌生长，所以醋酸菌不能将果汁中的糖类发酵为醋酸。(7)醋酸菌和酵母菌正常生长都需要一定的温度，在适宜温度时可得到较多代谢产物。(8)在酸性条件下，酒精与重铬酸钾发生颜色反应呈现灰绿色。8．(1)隔绝空气，制造无氧环境 丙酮酸和[H](少量ATP) (2)亚硝酸盐含量低 乳酸菌无氧呼吸产生了乳酸 (3)实验结果记录表如下推测实验结论：与普通乳酸菌相比，“优选”乳酸菌制作泡菜时，相同条件下产生的亚硝酸盐含量低。解析 (1)用水密封是为了隔绝空气，因为乳酸菌是厌氧型微生物；乳酸菌无氧呼吸第一阶段产生丙酮酸和[H]。(2)8天后亚硝酸盐含量更低，有利于人们的健康，而且泡菜的口感更好。pH呈下降趋势，是因为乳酸菌无氧呼吸积累了大量乳酸。(3)设计的记录表中要包含乳酸菌类型、食盐浓度和发酵时间等自变量，因变量为亚硝酸盐的含量。通过相互对照确定用“优选”乳酸菌制作泡菜过程中亚硝酸盐含量的高低，并确定最适发酵条件。考点整合体系重建①酒精消毒法 ②高压蒸汽灭菌法 ③碳源、氮源 ④稀释涂布平板法 ⑤酵母菌 ⑥果醋 ⑦毛霉 ⑧蛋白酶 ⑨乳酸菌 ⑩乳酸15\n二轮专题强化练答案精析专题十三 生物技术实践考点过关练31 微生物的利用与传统发酵技术的应用1．(1)纤维二糖 葡萄糖 (2)红 透明圈 (3)不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基乙中没有纤维素，不会形成CR纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌解析 (1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶能使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶能将纤维二糖分解成葡萄糖。(2)刚果红是一种染料，可以与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物就无法形成，培养基中就会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。(3)纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，而用于分离和鉴别纤维素分解菌的培养基为固体培养基，并且培养基中需含有纤维素，才能与CR形成红色复合物，有纤维素分解菌时才能形成以纤维素分解菌为中心的透明圈。2．(1)氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长繁殖 (2)细胞分裂素 母液 (3)接种环 ①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质 不合理，缺少空白对照解析 (1)微生物生长繁殖需要的主要营养物质包括碳源、氮源、水和无机盐四类。根据题意可知，土壤中某些微生物有降解苯磺隆的能力，该实验的目的是探索其降解机制，因此，需要分离出有降解苯磺隆能力的土壤中的某些微生物，故选择培养时为了排除其他碳源的干扰，培养基中唯一碳源只能是苯磺隆。(2)与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基需要添加生长素和细胞分裂素，用于调节植物细胞脱分化和再分化；这些植物激素一般需要事先单独配制成母液保存备用。(3)纯化菌株时，通常使用的划线工具是无菌接种环。划线的平板培养后，发现第一划线区域的划线上不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，而其他划线上有菌落。造成此现象的原因可能有两个：一是接种环灼烧后未冷却，菌种接触到高温的接种环而死亡；二是划第二划线区域第一条线时未从第一区域末端开始。(4)根据图乙所示实验中的上清液加入蛋白酶溶液推测，实验目的是探究目的菌株是否能分泌降解苯磺隆的蛋白质，实验设计不合理之处是缺少不加蛋白酶溶液、其他条件同图乙的空白对照。3．(1)酵母菌 先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O215\n后再进行无氧呼吸 (2)有氧呼吸 通入无菌空气 (3)杀灭杂菌 增加乳酸菌的数量(提供乳酸菌菌种) 玫瑰红 (4)菌丝解析 (1)制作果酒所用的微生物是酵母菌。果酒发酵过程中应先让酵母菌进行有氧呼吸而大量繁殖，然后通过无氧呼吸产生酒精，因此葡萄汁装瓶时要留约1/3的空间，以提供O2让酵母菌进行有氧呼吸，当O2耗尽后则进行无氧呼吸。(2)制作果醋所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是严格的好氧菌，其发酵方式为有氧呼吸，发酵过程中需不断通入无菌空气。(3)制作泡菜时所用盐水要灭菌，因此可用煮沸的方法杀灭杂菌。陈泡菜液中含有大量的乳酸菌，因此制作泡菜时加入陈泡菜液可以增加乳酸菌的数量，以加快发酵过程。检测亚硝酸盐时可让其先与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，其产物与N1萘基乙二胺盐酸盐结合，形成玫瑰红色染料，根据颜色的深浅与标准显色液的颜色进行比对，以确定亚硝酸盐的含量。(4)腐乳制成后表面的皮是毛霉的菌丝形成的，对人体无害。4．(1)选择 (2)18～25℃ 在此温度下，酶的活性最高，代谢最旺盛(3)重铬酸钾 稀释涂布平板 (4)碳源、氮源、水、无机盐和特殊营养物质 (5)转移到甘油中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中解析 (1)分离酵母菌使用的培养基为选择培养基。(2)酒精发酵的最适温度范围是18～25℃，在此温度下，酶活性最高，代谢最旺盛。(3)检测酒精，可在酸性条件下，使其与重铬酸钾溶液反应，呈现灰绿色。(4)果酒发酵时，酵母菌在果汁中生长繁殖，因此果汁为酵母菌提供各种营养物质，包括碳源、氮源、水、无机盐和特殊营养物质。(5)由“为了方便后续年级使用”推出，该菌种需要长期保存，可用甘油管藏法，即转移到甘油中，与甘油充分混匀后，放在－20℃的冷冻箱中保存。15
