限时集训(四十六) DNA和蛋白质技术(限时30分钟 满分60分)非选择题(共60分)1．(20分)DNA的粗提取与鉴定的实验(如下图)：(1)本实验材料选用鸡血细胞液，而不是鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中________含量较高。(2)图A所示加入蒸馏水的目的是________________________________。(3)通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol/LNaCl溶液的目的是________________________________________。(4)图C所示加入蒸馏水的目的是________________________________。(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用________试剂进行检测，在沸水浴条件下，可以看到颜色反应为________色。2．(20分)下图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题：(1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋白质具有________功能。(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是__________；乙装置中，C溶液的作用是________________________________________________________________________。(3)甲装置用于______________，目的是________________________。用乙装置分离蛋白质的方法叫____________________，是根据______________________分离蛋白质的有效方法。(4)用乙装置分离血红蛋白时，待________________时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。3\n3．(20分)红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O2或CO2。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。根据材料回答下列问题：(1)实验前取新鲜血液，要在采血器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。加入柠檬酸钠的目的是________________________。(2)在对样品进行处理时，主要包括________、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析技术的原理是__________________________________。(3)同学甲利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速率的因素包括蛋白质分子的____________、____________以及分子的形状等。(4)同学乙利用凝胶色谱法进行血红蛋白的分离(如图一)，他在操作中加样的正确顺序是______________________，在执行图一中②所示操作时，色谱柱下端连接的尼龙管应该__________________(打开或关闭)。(5)图二、图三分别是同学甲、乙利用同一种样品分离得到的结果，则图三中与图二中蛋白质P对应的是____________________。答案限时集训(四十六)1．解析：鸡血细胞没有细胞壁，而且细胞内DNA的含量较高。如图A所示，鸡血细胞液中加入蒸馏水后，细胞内渗透压较高，则鸡血细胞吸水而涨破。如图B所示，溶液中加入2mol/LNaCl溶液，DNA溶解而杂质析出。如图C所示，加入蒸馏水后，溶液浓度会降低，当浓度降至0.14mol/L时，DNA的溶解度最低而析出。在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。答案：(1)DNA(2)使血细胞吸水涨破，释放出核物质DNA(3)使DNA溶解于NaCl溶液3\n(4)调节DNA的浓度 使DNA的溶解度下降而析出(5)二苯胺 蓝2．解析：血红蛋白在氧分压高的地方与氧结合，在氧分压低的地方与氧分离，起到运输氧的作用。图甲表示的是透析过程，将装有血红蛋白溶液的透析袋放入盛有300mL的物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液中(pH为7.0)。透析的目的是去除样品中分子质量较小的杂质。图乙表示用凝胶色谱柱洗脱血红蛋白的操作示意图。相对分子质量较大的蛋白质不能进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质比较容易进入凝胶内部的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。从而使相对分子质量不同的蛋白质分子得以分离。这种分离血红蛋白的方法叫凝胶色谱法。样品的加入和洗脱的大致过程是：调整缓冲液面→滴加透析样品→样品渗入凝胶床→洗脱→收集。C溶液是磷酸缓冲液，其作用是洗脱血红蛋白。待红色的蛋白质接近色谱柱底端时开始收集流出液。答案：(1)运输 (2)磷酸缓冲液 洗脱血红蛋白 (3)透析(粗分离) 去除样品中相对分子质量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 (4)红色的蛋白质接近色谱柱底端3．解析：(1)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(2)对样品的处理包括红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析等步骤。其中透析的原理是小分子可以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过。(3)电泳时，影响蛋白质迁移速率的因素有蛋白质分子大小、带电性质及分子的形状等。(4)正确的加样顺序可依据样品在色谱柱及凝胶层中的渗入量进行分析，可以得出是④①②③；同时进行②所示环绕加样时，应打开下出口。(5)SDS凝胶电泳装置是垂直的装置，此种电泳方法主要取决于蛋白质分子的大小，与电荷无关，同时加样在“－”极，通电后，样品蛋白质向“＋”极移动，分子相对小的，移动距离大，因此从图二的电泳结果分析，P比N、M移向“＋”距离大，说明P的分子相对比较小，因此洗脱出来的时间比较长，符合图三中的丙。答案：(1)防止血液凝固 (2)红细胞的洗涤 小分子可以自由进出透析袋(半透膜)，而大分子不能通过 (3)大小 带电性质 (4)④①②③ 打开 (5)丙3
