【大高考】（三年模拟精选）2022届高考生物第十一单元专题二十六克隆技术（全国通用）A组 基础巩固1.(2022·江苏如皋模拟)植物组织培养技术被广泛应用于培育无病毒植株、育种及获得植物次生代谢产物等生产生活实际。下图为番茄植株的培育过程。分析回答：(1)①过程中使用了____________酶，获得植物细胞原生质体，此处使用的溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体____________。(2)铺平板类似于微生物接种，该过程必须在________旁进行操作。平铺板中添加蔗糖的目的除了提供营养外，还有________作用(3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因________(填“相同”、“不相同”或“不一定相同”)；图中属于再分化的过程是________(填序号)。(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，可选择在图中的过程③中添加________进行处理，也可以选择在过程⑥中添加________进行处理。解析 (1)①过程中使用了纤维素酶和果胶酶，获得植物细胞原生质体，此处使用的溶液浓度不宜过小，以防止细胞原生质体吸水涨破。(2)铺平板类似于微生物接种，该过程必须在酒精灯火焰旁进行操作。平铺板中添加蔗糖的目的除了提供营养外，还有调节渗透压作用。(3)同一番茄植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因不一定相同6\n，如花粉细胞和体细胞培养形成的植株愈伤组织的基因型不同。图中属于再分化的过程是⑨⑩。(4)多倍体番茄植株所结果实中维生素含量更高，若想培育多倍体番茄，可选择在图中的过程③中添加聚乙二醇进行处理，也可以选择在过程⑥中添加秋水仙素进行处理。答案 (1)纤维素酶和果胶(答“纤维素酶”也可) 吸水涨破(2)酒精灯火焰 调节渗透压(3)不一定相同 ⑨⑩(答⑨或⑩也可)(4)聚乙二醇 秋水仙素2.(2022·湖北七市联考)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题。(1)图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过________________两个关键步骤，该过程依据的原理是________________。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、________、温度和光照外，还必须在________的条件下进行。(3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性，少室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为__________________________。(细胞A为两两融合细胞)(4)图Ⅲ、Ⅳ过程中需要去除细胞壁，获得具有活力的____________。(5)在图中Ⅳ过程中，经过鉴别和筛选后，通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状，根本原因是__________________________________________________________________________________________________________________。解析 (1)图Ⅰ中植物组织培养过程，需要经过脱分化和再分化两个关键步骤，其原理是植物细胞的全能性。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、植物激素(生长素、细胞分裂素)、温度和光照外，还必须在无菌的条件下进行。(3)Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂。红果多室(Yymm)番茄植株产生的花粉基因型为Ym、ym，6\n故Ⅲ过程中植物体C的基因型为YYmm、Yymm或yymm。(4)植物体细胞杂交时，要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，获得原生质体。(5)图Ⅳ中经植物体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质，能表现出两个亲本的遗传性状。答案 (1)脱分化和再分化 植物细胞全能性(2)植物激素(生长素、细胞分裂素) 无菌(3)有丝分裂 YYmm或Yymm或yymm(4)原生质体(5)具有两个亲本的遗传物质3.(2022·山东潍坊一模)下图表示构建转抗体基因小鼠生产人源性单克隆抗体的流程。请据图回答问题：(1)图示过程涉及的生物技术有__________、__________、__________。(2)①过程使用的工具酶有____________________；构建的基因表达载体除含有人抗体基因、启动子、终止子外，还应具有__________。(3)向转基因小鼠注射特定的抗原后，从小鼠的________中提取B淋巴细胞；②过程通常用________________________诱导。(4)细胞X是________，体外培养细胞X所用的培养液必须添加________等天然成分，培养过程中会产生接触抑制吗？________________。解析 (1)图示过程涉及基因工程、动物细胞培养、动物细胞融合、胚胎移植等技术。(2)①过程为基因表达载体的构建，需限制酶、DNA连接酶等工具酶；基因表达载体应包括目的基因、启动子、终止子及标记基因。(3)提取B淋巴细胞可从免疫器官脾脏中提取；动物细胞融合常用的诱导剂是灭活的病毒或聚乙二醇等。(4)细胞X应为骨髓瘤和B淋巴细胞融合产生的杂交廇细胞，体外培养时培养液中需添加血清或血浆天然成分，由于瘤细胞已丧失接触抑制，故杂交瘤细胞不会产生接触抑制现象。答案 (1)转基因技术 动物细胞培养 动物细胞融合(其他合理答案亦可) (2)限制酶、DNA连接酶 标记基因 (3)脾脏 聚乙二醇或灭活的病毒 (4)杂交瘤细胞血浆或血清 不会6\nB组 能力提升1.(2022·黑龙江哈三中第一次模拟)科学家以番茄(2N)和马铃薯(4N)为材料利用下图技术得到“番茄—马铃薯”植株。请回答下列问题：(1)获得a、b所选用的酶为________，c和d的名称依次是________、________。(2)图示技术名称是________；由d培育成植株的过程运用的技术手段是________，其依据的原理是__________________________________________。(3)过程②称为________，所用的化学诱导剂一般是________，③过程成功的标志是______________________________________________________________。(4)过程④是________，⑤过程增殖的方式为________，诱导f中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(高/低)；最终获得的“番茄—马铃薯”属于________倍体植株。解析 本题考查了植物细胞工程的相关内容，着重考查理解能力。(1)①为去壁过程，该过程需要采用酶解法，即使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体a、b；②是诱导原生质体融合的过程，c是正在融合的原生质体，d是经过③是再生细胞壁后形成的杂种细胞。(2)图示为植物体细胞杂交技术获得“番茄—马铃薯”植株的过程，由杂种细胞培育成植株运用的技术手段是植物组织培养，其依据的原理是植物细胞全能性。(3)②是诱导原生质体融合的过程，所用的化学诱导剂一般是PEG(聚乙二醇),③是再生细胞壁，成功的标志是再生出细胞壁。(4)④脱分化形成愈伤组织的过程,由愈伤组织再分化形成试管苗的过程中细胞增殖的方式是有丝分裂,诱导分化时生长素与细胞分裂素的比值高促进根的分化,获得的“番茄—马铃薯”具有二者的染色体，为异源六倍体植株。答案 (1)纤维素酶和果胶酶 (正在融合的)原生质体 杂种细胞(2)植物体细胞杂交技术 植物组织培养 植物细胞全能性(3)原生质体融合 PEG(聚乙二醇) 杂种细胞再生出细胞壁(形成新的细胞壁)(4)脱分化 有丝分裂 高 六2.(2022·泰州模拟改编)如图所示为获得转基因鼠和单克隆抗体的制备过程，据图回答下列问题：6\n(1)过程Ⅰ将目的基因导入受体细胞的方法是________。在分子水平上检测该过程是否成功的程序是______________________________________________。(2)过程Ⅱ表示受精卵经过体外培养，形成早期胚胎，再移植到受体母鼠体内。培养过程中，培养液中添加一定量的________，以防止杂菌污染，此外，应____________以便清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。(3)过程Ⅳ可以形成________种融合细胞，为了获得所需要的抗体，我们还需要的操作是________。解析 (1)根据图中“注射吸管”“受精卵”等信息可知，过程Ⅰ是采用显微注射法把目的基因导入受体细胞。在分子水平上检测目的基因是否成功导入受体细胞，通常采用DNA分子杂交技术。(2)过程Ⅱ中，在进行受精卵的体外培养时，根据“防止杂菌污染”这一信息可知，培养液中要添加一定量的抗生素；为防止细胞代谢产物积累对细胞自身的危害，应定期更换培养液。(3)过程Ⅳ是骨髓瘤细胞和免疫过的B淋巴细胞的融合过程，相同细胞之间的融合有2种，不同细胞之间的融合有1种；为了获得单克隆抗体，一般需要两次筛选。答案 (1)显微注射法 带有放射性同位素等标记的含有目的基因的DNA片段与提取的DNA或RNA混合，如果出现杂交带则说明导入成功(2)抗生素 定期更换培养液(3)3 筛选3.(2022·甘肃模拟)红豆杉，又名紫杉，可从其树皮中分离出高抗癌活性的紫杉醇。下面是某同学设计的有关紫杉醇抗肿瘤实验的研究流程，请分析回答：(1)酶X是________酶，其主要作用是________。(2)物质Y是________，乙组起________作用。6\n(3)细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同，例如，需要有________、________、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆。(4)为清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应采取的措施是________。(5)实验结果：若甲组____________________________，说明紫杉醇有抗肿瘤作用。(6)为了解决紫杉醇的药源问题，理论上可用________技术，把离体的红豆杉细胞经过________培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。解析 (1)动物细胞培养时，需先要用胰蛋白酶、胶原蛋白酶将组织细胞分散开，从而得到单个细胞。(2)实验设计时，需要遵循对照原则和单一变量原则，此实验的目的是探究紫杉醇对肿瘤细胞的作用，所以单一变量是有无紫杉醇，加入紫杉醇的甲组为实验组，则乙组应加入等量的生理盐水，作为对照组。(3)细胞体外培养所需营养物质有糖(葡萄糖)、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入血清、血浆等天然成分。(4)定期更换培养液可清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。(5)若紫杉醇有抗肿瘤作用，则实验结果应是：甲组肿瘤细胞的数目少于乙组。(6)为了解决紫杉醇的药源问题，可采用植物细胞培养技术，即用植物组织培养技术把离体的红豆杉细胞经过脱分化培养成愈伤组织，从中提取紫杉醇，进行加工生产。答案 (1)胰蛋白(胶原蛋白) 使肿瘤细胞分散开(2)生理盐水 对照(与紫杉醇形成对照)(3)糖(葡萄糖) 氨基酸(4)(定期)更换培养液(5)肿瘤细胞的数目少于乙组(6)植物组织培养 脱分化6
