专题训练22 微生物的利用一、选择题1.下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( )A.防止杂菌污染B.接种前菌种要进行灭菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前2.要筛选得到纯净的菌种,通常在固体培养基上划线分离,下列操作正确的是( )A.每次划线时,接种环都需蘸菌液一次B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种C.在超净台中接种时要在酒精灯火焰旁进行D.划线分离后将培养皿正放在恒温培养箱中培养3.分离以尿素为唯一氮源的细菌时,培养基中加入酚红的目的是( )A.筛选出能分解尿素的细菌B.对分离的菌落作进一步鉴定C.培养基中的酚红可作为细菌的营养D.若酚红变蓝就能认定该菌能分解尿素4.分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基,下列叙述正确的是( )A.前者含琼脂,后者不含琼脂和琼脂糖B.两者都含有琼脂C.前者含有琼脂糖,后者不含琼脂糖但含琼脂D.两者都不含琼脂和琼脂糖5.下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述,正确的是( )A.倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理B.应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作D.倒好培养基的培养皿,要立即将平板倒过来放置6.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应,用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触),将平板置于37℃条件下恒温培养3d,结果如图所示。从实验结果分析,下列叙述不正确的是( )A.链霉素可以用作治疗伤寒B.链霉素对结核杆菌比对霍乱菌更有效C.链霉素对结核杆菌比对伤寒菌更有效D.链霉素能阻止结核杆菌的生长7.以下操作与获得单个的菌落无关的是( )A.每次划线之前都要灼烧接种环B.第二次及以后的划线总是从上次划线的末端开始C.对菌液进行系列稀释操作D.接种结束,对接种工具灭菌8.如图是研究人员从红棕壤中筛选高效分解尿素细菌的过程示意图,下列有关叙述错误的是( )5\nA.在配制步骤②③的培养基时,应先调pH值后髙压蒸汽灭菌B.步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落C.步骤③采用涂布平板法接种,并需向牛肉膏蛋白胨培养基中加入尿素D.步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力二、非选择题9.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程,请回答下列问题。A.配制培养基→B.灭菌→C.培养(液体培养基)→D.划线分离和培养(固体培养基)→E.菌种短期保存(1)A过程配制的是通用细菌培养基,称为 培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外,还要加入一定量的氯化钠,以维持 。对培养基pH的调节,应该在B过程的 (填“前面”或“后面”)。 (2)E过程所需的温度是 。 (3)D过程后,一个菌体便会形成一个 ,这种分离方法是 的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。 10.下列是有关大肠杆菌的培养实验,请回答下列问题。(1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和 作为营养物质。 (2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在 中进行扩大培养,培养液经 后,在LB固体培养基上进行 ,并将培养皿 放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及 ,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。 (3)对于获得的纯菌种,通常可以依据 的形状、大小等特征进行初步的鉴定。 (4)关于“大肠杆菌培养和分离”的操作中,下列叙述正确的是 。 A.高压蒸汽灭菌结束时,打开排气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖B.倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上C.为了防止污染,接种工具经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上11.(2022江苏高考)苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。小明同学准备依据图1操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题。图1(1)酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有 。 (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐 ,以达到富集酚降解菌的目的。若图1平板中菌落过于密集,应进一步 ,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加 。 5\n(3)图2为连续划线法示意图,在图中 (填图中序号)区域更易获得单菌落。 (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为 。 管号123456苯酚浓度(mg/L)1如果废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释 (填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。 12.(2022浙江绿色联盟联考)已知某细菌的两种突变类型细菌Ⅰ和细菌Ⅱ的营养条件和菌落特征都相同,但细菌Ⅰ能分解有机物A而不能分解有机物B,细菌Ⅱ能分解有机物B而不能分解有机物A。现有这两种类型细菌的混合液样品,要将其分离,有人设计了一种方案,部分操作步骤如图。步骤一:从混合样品中取样接种到多个平板培养基中,在适宜温度下培养若干天。步骤二:从平板培养基中蛇形线末端的单个菌落中取菌种接种到含A、B有机物的培养液中(A、B有机物的起始浓度已知),在适宜温度下培养若干天。步骤三:测定各瓶中A、B两种有机物的含量,再根据测试结果采取不同措施。 (1)步骤一使用的是 培养基,其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质,此外还必须加入 ,以利于对不同菌种进行分离操作。 (2)步骤一采用 方法接种,此接种法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可形成单个、独立的 ,最终可能得到纯种的细菌;要进行上述接种操作,必须在 及酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。 (3)步骤三中,若对其中某瓶培养液中A、B两种有机物的含量进行测定,当培养液中检测出如下的实验结果,其中能说明培养液中只有细菌Ⅰ的是 。 A.有机物A与B含量都明显下降B.有机物A含量明显下降,B含量基本不变C.有机物A含量基本不变,B含量明显下降D.有机物A、B含量都基本不变专题训练22 微生物的利用5\n1.B 解析 发酵工程中,灭菌的目的是防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,避免操作者自身被微生物感染,是成功培养微生物的关键,实验所用器具,如培养基和发酵设备都必须灭菌,A、C项正确;菌种是培养对象,不可被灭菌,B项错误;灭菌过程应在实验操作之前,D项正确。2.C 解析 采用划线分离,菌种只蘸取一次,A项错误;划线分离,接种环在培养基表面进行划线操作,B项错误;微生物培养的关键是无菌操作,因此,在超净台上接种时,需要在酒精灯火焰旁进行,以防止空气中微生物的污染,C项正确;划线分离结束后,培养皿倒置于恒温培养箱中,D项错误。3.A 解析 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,培养某种细菌后,若尿素被分解,会产生氨气,使培养基的pH升高,酚红指示剂的颜色变红,这样就能初步筛选出能够分解尿素的细菌。4.C 解析 分离微生物所使用的均是LB固体培养基,分离以尿素为氮源的细菌,培养基凝固剂为琼脂糖,分离大肠杆菌,培养基凝固剂为琼脂,C项符合题意。5.C 解析 培养基应该在倒平板之前进行高压蒸汽灭菌,A项错误;倒平板时,用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,不能打开皿盖,B项错误;为防止微生物污染,要在酒精灯火焰旁进行操作,C项正确;倒好培养基的培养皿等培养基凝固后要倒过来放置,D项错误。6.A 解析 抗生素是真菌(另外还有放线菌)产生的可杀死某些致病菌的物质,可以用来治疗相应的疾病。链霉菌产生的链霉素是一种抗生素类物质,它可以抑制某些细菌的繁殖。从实验结果可以看出:链霉素对结核杆菌的抑制作用最强,对霍乱菌的抑制作用较弱,对伤寒菌几乎无抑制作用。7.D 解析 每次划线之前都要灼烧接种环,杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,使下一次划线的菌种来自来上次划线的末端;第二次及以后的划线总是从上次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落;对菌液进行系列稀释操作,这样易于获得单个菌落;接种结束,对接种工具灭菌,其目的是杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染或感染操作者。8.C 解析 在配制步骤②③的培养基时,应先调pH值后髙压蒸汽灭菌,A项正确;步骤③纯化分解尿素细菌的原理是将聚集的细菌分散,以获得单菌落,B项正确;要筛选出能高效分解尿素细菌,所选用的培养基要以尿素为唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有尿素,因此步骤③所用的培养基中不能含有牛肉膏蛋白胨,C项错误;步骤④挑取③中不同种的菌落分别接种,比较细菌分解尿素的能力,D项正确。9.(1)LB 渗透压 前面 (2)4℃ (3)单菌落 消除杂菌污染解析 (1)培养微生物的培养基为LB培养基,培养基中加入一定浓度氯化钠用于维持培养液的渗透压,培养基应调节好pH后再进行灭菌。(2)短时间内保存菌种,将菌种接种于斜面上,置于4℃冰箱进行保存。(3)经过分离,一个菌体形成一个单菌落,单菌落是消除杂菌污染的通用方法,也是筛选特定菌株的最简便方法之一。10.(1)酵母提取物 (2)LB液体培养基 稀释 分离 倒置 无菌操作是否规范 (3)菌落 (4)D解析 (1)配制培养大肠杆菌的培养基时,根据“细菌喜荤,霉菌喜素”的规律,通常在培养基中加入蛋白胨和酵母提取物作为营养物质。(2)大肠杆菌培养和分离的实验中,在LB液体培养基中进行扩大培养,培养液经稀释后,在LB固体培养基上进行分离,并将培养皿倒置放在恒温培养箱中培养,可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及无菌操作是否规范,应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。(3)对于获得的纯菌种,通常可以依据菌落的形状、大小等特征进行初步的鉴定。(4)高压蒸汽灭菌结束,等待压力表指针回到零后,才能开启锅盖,不能打开排气阀使压力表指针回到零,A项错误;倒平板过程中不能打开培养皿的皿盖,B项错误;接种环在火焰上灼烧后,待冷却后才可以快速挑取菌落,C项错误;用记号笔标记培养皿中菌落时,应标记在皿底上,D项正确。 11.(1)蛋白胨、苯酚 (2)增加 稀释涂布 凝固剂(3)③ (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8 ③5\n解析 (1)蛋白胨、苯酚中含有碳元素,均可以作为碳源。(2)分析实验可知,实验目的是筛选酚降解菌,因此将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐增加,以达到富集酚降解菌的目的。若图1平板中菌落过于密集,应进一步稀释涂布,以便于菌落计数与分离。平板培养基属于固体培养基,制备该培养基时需要加入琼脂作为凝固剂。(3)图2为划线分离,随着划线次数的增加,菌种进一步被稀释,因此图中③区域更易获得单菌落。(4)进行实验时,首先需要设置浓度为0的苯酚作为空白对照组,并且6号试管苯酚浓度为1mg/L,由此可见,浓度梯度应该为0.2,即表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。如果废水为50mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,即残留液中苯酚浓度约为10.5mg/L,比色管中苯酚的浓度范围为0~1mg/L,故需要将残留液稀释20倍后再进行比色。12.(1)LB固体 琼脂 (2)划线 菌落 超净台 (3)B解析 (1)步骤一表示将菌种分离培养,使用的是LB固体培养基,其中含有细菌生长所需的水、无机盐、碳源和氮源等营养物质;固体培养基中需要加入琼脂作为凝固剂。(2)根据题图文字信息“蛇形线末端”可以确定步骤一采用划线分离接种,此接种法可使接种细菌逐渐稀释,经适宜条件培养,可形成单个、独立的菌落,最终可能得到纯种的细菌;要进行上述接种操作,必须在超净台及酒精灯火焰附近进行,以避免杂菌污染。(3)若A与B两种有机物含量都明显下降,说明瓶中同时存在细菌Ⅰ和细菌Ⅱ,说明两者未分离;若A含量明显下降,而B含量基本不变,说明培养液中只有细菌Ⅰ;若B含量明显下降,而A含量基本不变,说明培养液中只有细菌Ⅱ;如果化合物A、B含量都基本不变,说明培养液中没有这两种细菌。5
